生物技术专业实践教学体系

 

一、实践教学体系建设的指导思想 

遵循《中共中央、国务院关于深化教育改革，全面推进素质教育的决定》和《关于引导部分地方普通本科高校向应用型转变的指导意见》，贯彻内江师范学院“以学生为主体，教学做统一”的育人模式，把提高学生综合素质、培养创新精神和应用实践能力作为实践教学的主要目标；坚持贯彻“理论与实践相结合，服务行业，服务社会”的办学理念，坚持以学生职业岗位胜任能力培养为主线，建立一个适应区域经济和社会发展需要、符合应用型人才教育规律的实践教学体系。

二、实践教学体系建设的基本原则 

1、针对性原则。实践教学体系要有明确的目标，面向行业和职业岗位的针对性。针对专业特点，分析履行未来岗位（群）职责所需的知识结构与能力结构，以此来确定实践教学体系的总体框架。 

2、一体化原则。实践教学涉及教学内容、实施、管理、监控、保障等要素。实践教学活动各要素之间不仅要做到协调统一，还要从人才的全面素质和能力发展的要求出发，注意教学各环节的相互配合。同时注意实践教学与理论教学的互相渗透，与教学内容和课程体系改革相适应，做到“以学生为主体，教学做统一”。

3、规范化原则。根据社会需求和学生就业需要，在人才培养方案中规范实践教学的内容和形式，制定出相应的考核标准和要求，建立完善的考核评价体系。

三、实践教学体系建设的目标 

    生物技术专业培养目标。。

 

 根据生物技术专业培养目标、人才培养规格和岗位资格标准，遵循实践教学体系建设的基本原则，按学生的认知规律，体现应用型人才培养的职业取向性和行业、岗位针对性，加强学生应用技术能力的培养。重构实践课程体系，优化实践教学内容，将实践教学与行业岗位资格标准并轨，建立符合应用技术型人才培养目标要求的实践教学体系。通过实践教学体系的实施，不仅使学生的专业技能得到培养和锻炼，而且使学生的综合素质得到提高，使培养的学生成为社会适应能力强、具有较强实践技能和创新能力的新型应用技术性人才。

四、实践教学体系的构建 

（一）实践教学体系总体框架：一主线、两平台、三训练、四能力，建立“一、二、三、四”实践教学体系（图1）。坚持以学生职业岗位胜任能力培养为主线，依托两大平台（校内实践平台、校外实践平台），通过三种训练（职业基本素养训练、专业实践训练、综合实践训练），着力培养学生四种能力（职业基本能力、专业实践能力、生产实践能力和创新创业能力）（表2）。 

图1 “一、二、三、四”实践教学体系模式

表2 生物技术专业学生能力结构

能力层次	序号	能力项目	实践教学环节
职业基本能力	1	大学生基本素质	大学生思想政治课程、心理健康教育、职业道德修养专题教育等
	2	计算机应用	计算机基础
	3	外语应用	大学英语听力、口语、阅读、写作
	4	文献检索与写作	科技文献检索、科技论文写作
专业实践能力	1	专业基础训练	植物学实验、动物学实验、微生物学实验、遗传学实验、（考虑微生物资源与利用）
	2	细胞培养、组织培养	细胞生物学实验、组织培养实验实训
	3	生物活性成分分离提取	生物化学实验、细胞与分子生物学实验、生物活性物质的提取与利用、专业见习
	4	药理毒理评价分析	药理毒理学实验、生物药物分析（加课程）
	5	生物技术制药技能	生物制药工艺学实验、生物药物制剂实验、
	6	生物检验检测	生物检测技术实验、分子生物学实验、免疫学实验
生产实践能力	1	生产工艺控制	发酵工程与设备实验、生物制药工艺学实验、原料药加工与生产实验
	2	生产质量管理	药品生产质量管理、药品及原材料保管与养护
创新创业能力	1	创新训练	生物类学科专业竞赛、大学生科研项目等
	2	创业训练	大学生创业项目竞赛、“互联网+”创业项目等
	3	综合实践	专业见习、专业实习、毕业论文

 

（二）实践教学体系具体组成模块

1、内容体系 

    分为职业基本素养训练、专业实践训练、综合实践训练三个模块。

职业基本素养训练包含专业相关的基本操作技能与必要的一般技能（涵盖人文素养等 ），通过基础性实验实训实现（表3）。 

表3 生物技术基础实践训练体系

 

 

 

专业实践训练包含专业技能与高层次的一般技能（如思考技能、方法技能、问题解决技能、学习技能等），通过综合性、设计性实验实训实现（表4）。 

表4 生物技术专业实践训练体系

课程或项目名称	教学目标	主要内容	考核要求	实践时数	备注
动物学实验	通过动物学实验教学课程的学习，使学生进一步巩固理论知识，加强实验技能的训练，掌握较为扎实的动物解剖技能和其生理结构，为后续的生物制药课程学习打下扎实的基础。 同时在掌握动物结构功能相结合的基础上，通过课堂讨论掌握各门动物在生产实践中的应用。为打开学生科研思维及以后就业、自主创业奠定坚实的基础。	1、显微镜的结构和使用及人口腔黏膜上皮细胞的涂片制备与观察 2、草履虫采集、培养及观察 3、水螅及涡虫采集及结构观察 4、河蚌、螯虾的解剖及结构观察 5、鲫鱼的外形观察、抽血技术和内部解剖 6、青蛙的解剖和结构观察 7、鸡人工采精技术及精液品质检查 见附件	考核类型：考查，考核形式：闭卷，成绩组成：本课程属课带实验，其成绩占本门课程总成绩的30%。这30%的成绩按照以下比例进行计算： + 实验报告40%+ 期末成绩60%。	24学时
植物学实验	通过该课程的教学，使学生比较全面、系统地掌握植物学实验的基本技巧和基本方法。更好地理解所学的理论知识。在教学中，着重培养学生显微镜使用和临时装片制作的基本操作技能，培养学生观察分析问题的能力，使学生掌握植物的基本形态结构以及理解结构与功能的关系，为遗传学、细胞生物学等课程的实践教学奠定基础。。。能力	实验一：显微镜的使用及植物细胞结构的观察 实验二：植物组织的比较观察 实验三 ：根的比较观察 实验四：茎的比较观察 实验五 ：叶的比较观察 实验六 ：校园裸子植物采集、鉴定及植物标本的制作 实验七：内江市区公园、行道绿化乔木种类调查 具体见附件	考核类型：考查，考核形式： 实验预习及实验操作过程60%+实验报告40%。	24学时
人体解剖生理学
生物化学实验	通过本实验课程学习，学会观察、描述、分析生化反应的基本知识，掌握正确的移液、滴定、恒温水浴，离心等实验操作技能。使学生能在科研、生产中完成氨基酸和蛋白质成分的分离鉴定以及酶制剂活力检测等工作。 通过综合性实验培养学生分析能力、设计能力，以及独立思考的能力和创新能力。	实验主演内容包括：1.蛋白质分离鉴定类：纸层析法分离鉴定氨基酸；蛋白质及氨基酸的呈色反应；蛋白质的沉淀反应；血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳； 2.     酶系列实验：酶的特性；谷丙转氨酶的作用； 3.     综合实验：植物组织内可溶性蛋白质的分离与含量测定 具体内容见附件	考核类型：考查 考核形式：闭卷 成绩组成：本课程属课带实验，只对其平时成绩考核，学生的平时成绩占总课程成绩20％。 平时成绩包括：考勤（5％）、实验报告（10％）及课堂参与度（5％）评价。	24学时
微生物学实验	“微生物学实验”是对学生从事微生物学相关操作及检测工作能力培养的重要环节，是与微生物学理论课程相配合的实践训练课程，旨在使生物技术专业学生得到较好的微生物学实验操作与技能训练，培养学生认真观察，独立思考和辩证分析问题的能力，建立严格的科学作风，严肃的科学态度和严密的工作方法。并启发学生的创新能力，为今后从事微生物学相关方面的科研、生产、教学打下坚实的基础。	包括6个实验项目：（1）微生物学实验的基本操作技术；（2）微生物接种与培养；（3）微生物的显微计数；（4）微生物的形态特征及常用的染色方法；（5）微生物的生理生化实验；（6）四种微生物的鉴别。详细实验内容见附件2。	考核类型：考查 考核形式：闭卷 成绩组成：本课程属于课带实验型，突出理论与实践运用的综合性，采取实验成绩（30%）+理论成绩（70%）的考核方式，实验成绩以百分制计包括：考勤（20%）、实验操作与课堂参与（30%）、实验报告（50%）。	24学时
遗传学实验	通过本课程的学习，加深学生对遗传学理论知识的理解和巩固；掌握遗传学研究有关的基本技术、研究方法和操作技能；通过综合性实验和设计性实验，培养和提高学生的实验设计能力，实验动手能力以及文献查阅、论文写作的能力；培养学生的科学思维方法，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力。	实验一：有丝分裂 实验二：减数分裂 实验三：植物的核型分析 实验四：果蝇的饲养、果蝇的形态及生活史观察 实验五：植物多倍体诱发与检测 实验六：人群中PTC味盲基因频率的分析	考核类型：考查 考核形式： 实验预习及实验操作过程60%+实验报告40%。	24学时
细胞生物学实验	通过本课程的学习，使学生较系统地学习和掌握细胞生物学实验的基本原理、基本知识和基本技能；培养学生实践操作能力和科研素养及科研技能；提高学生分析问题和解决问题的能力，使学生具备从事本专业实际工作和研究工作的初步能力。	特殊显微镜的使用；细胞膜的通透性观察；叶绿体的分离与荧光观察；线粒体和液泡系的超活染色与观察；细胞骨架的观察；动物细胞融合；石蜡切片技术及PAS反应法显示多糖；鸡血细胞凋亡诱导及形态观察见附件	考核类型：考查 考核采用平时表现、实验报告成绩和期末考试成绩相结合的方式进行，平时表现30％（实验的预习与操作、出勤情况），实验报告30%，期末卷面考试40％。	24学时
分子生物学实验	通过本实验课程的学习，使学生掌握分子生物学常用实验基本操作技术及更好的理解相关理论知识；提高学生在分子生物学实验方面的相关操作技能，为专业课程的学习及参加科研实践提供基础；通过实验教学巩固理论知识，使理论和实践结合起来，培养同学独立思考的能力以及创新能力。	分子生物学实验安全注意事项及分子生物学实验常用仪器设备的规范操作；动物组织基因组DNA的提取（第二次）与琼脂糖凝胶电泳检测（第三次）；动物组织蛋白的制备、浓度检测（第四次）及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测(第五次)；分子生物学软件的使用见附件	考核类型：考查 考核形式：闭卷成绩由三部分构成：平时表现10%（实验的预习与操作、出勤情况）+ 实验报告20%+ 期末考核70%（期末试卷与实验技能的考核）。	24学时
发酵工程与设备实验	“发酵设备与工程实验” 是与发酵设备与工程理论教学配套的基本实验技能课程，旨在培养生物技术专业学生在掌握微生物和发酵理论的基础上进行实践性教学。通过对实验各个环节的操作训练和实践，使学生对整个微生物发酵生产过程有全面认识和理解。既可培养他们的实际操作的技能，又可以达到提高他们理论联系实际能力的目的。通过学习，使学生掌握发酵工程常用的实验方法和常见的发酵工程设备，为以后从事生物发酵相关的学习和科研工作打下良好的基础。	包括五个实验项目：（1）酸奶中乳酸菌的分离；（2）微生物的诱变育种；（3）管碟法测定抗生素的生物效价；（4）发酵罐的构造及操作；（5）摇床培养确定酵母菌体的培养和营养条件。详细实验内容见附件3。	考核类型：考查 考核形式：闭卷 成绩组成：本课程属于独立实验型，突出理论与实践运用的综合性，采取平时成绩（50%）+考试成绩（50%）的考核方式，平时成绩以百分制计，包括：考勤（10%）、实验操作（10%）、课堂讨论与问题回答（10%）、实验报告（60%）。	32学时
生物检测技术实验	通过饮用水中菌落总数检测及大肠菌群检测实验，能够对饮用水中菌落总数及大肠菌群情况做出准确、规范的报告，从而培养学生对药物和食品进行正确的分析和检测的能力。通过葡萄酒中细菌、霉菌和酵母菌的计数实验及微生物的一般生化反应实验，培养学生正确检测、评价、鉴定食品、药品中微生物的技能。通过蛋白质的颜色反应和沉淀反应实验，培养学生对食品中蛋白类成分的定性分析能力和蛋白类药品的定性和定量分析检测的能力。	饮用水中菌落总数的测定；MPN法检测饮用水中中大肠菌群的测定；葡萄酒中细菌、霉菌和酵母菌的计数；葡萄酒中细菌、霉菌和酵母菌的生理生化测定；蛋白质的颜色反应和沉淀反应；牛黄解毒片中蒽醌类成分的定性鉴别。	考核类型：考查；考核形式：闭卷；成绩组成：本课程属于课带实验型，突出理论与实践运用的综合性，采取平时成绩（50%）+考试成绩（50%）的考核方式，平时成绩包括：考勤、作业、课堂讨论与问题回答、实验报告。	32学时
原料药加工与生产实验	通过药物合成工艺路线实验设计，培养学生分析评价制药工艺路线的能力，并择优选择工艺路线；通过实践药物合成过程，培养学生溶剂配制、仪器使用等基本技能；通过对药物的提取分离纯化方法，定性定量鉴定等实践操作，为企业和社会培养应用型技术人才。 锻炼学生选择廉价生物材料和简易方法制备生物药物的技能。	阿司匹林的合成；磺胺醋酰钠的合成；槐米中芦丁的提取、分离与鉴定；细胞色素C的制备和测定；白芷中香豆素的提取及鉴定；天然生物活性物质的提取和鉴定。	考核类型：考查，考核形式：闭卷；成绩组成：本课程属于课带实验型，突出理论与实践运用的综合性，采取平时成绩50%+期末成绩50%的考核方式，平时成绩包括：考勤、实验过程、实验报告、作业等。	24学时
生物活性成分分离提取	本课程旨在通过理论和实践训练，让学生掌握分离纯化的基本原理，并能在实践中加以应用，提高学生分析问题和解决问题的能力，同时适当向学生介绍前沿新技术和发展趋势，让学生掌握常见生物产物的提取、分离技术，掌握实用的现代分离纯化技术，为在生产实践中胜任生物资源产品的生产加工、质量管理等工作打下基础。	见附件1	考核类型：考查 考核形式：闭卷 成绩组成：本课程属于课带实验型，突出理论与实践运用的综合性，采取平时成绩（50%）+考试成绩（50%）的考核方式，平时成绩包括：考勤、作业、课堂讨论与问题回答、实验报告。	16学时
药用植物组织培养
专业见习	专业见习是加强本专业学生理论与实践相结合的重要实践教学环节。通过专业见习，使学生进一步了解行业发展趋势，熟悉企业生产技术流程，在实践中加深对理论知识的综合理解，提高对生物技术专业知识各技术环节的整体认识，提高分析和解决问题的能力，强化学生专业素养的提高。	1. 熟悉和了解生物制药和食品工程相关企业规模、经营管理、人员组成、经济效益等。 2. 熟悉并掌握生物技术企业相关技术流程； 3. 熟悉并掌握生物技术相关设备的使用、管理和操作。	学生见习后在规定的时间内，完成见习任务，由见习带队老师根据学生综合表现签署考核意见，并评定实习成绩。 成绩评定： 考勤20%+见习综合表现40%+见习报告成绩40%	2个周
专业实习	使学生掌握本专业基本的生产实际知识，巩固和丰富已学过的专业知识。培养学生理论联系实际，在生产实际中调查研究、观察问题、分析问题、解决问题的能力，为毕业论文和设计奠定基础。 通过实习，要求学生深入行业企业的实际工作环境，了解行业企业的生产状况，管理经营情况和行业发展现状与前景，熟悉掌握食品和生物产品等的生产工艺过程，并将学过的基础理论和知识与生产实际结合起来，培养学生踏实认真的工作态度和工作作风。	（1）了解工厂的历史、现状和发展前景，各职能科室和车间的管理体制，以及生产组织和管理方面的经验。了解企业的规章制度和生产安全措施。  （2）掌握主要产品的生产工艺过程及原理，掌握生产车间的主要设备和工艺管线的布置，运用学过的基本理论和知识分析生产实际的问题。  （3）掌握主要产品的质量保证程序以及主要质量指标的检测方法。 （4）了解企业产品开发的方法和程序。（5）了解企业产品营销的方法和市场网络的组织。 （6）分析和评价实习工厂的布局设计及环境保护情况。 （7）理解企业对于大学毕业生的需求和要求。  （8）对相关毕业课题进行调查研究，收集和分析资料。	按照生命科学学院实践教学考核要求进行成绩评定和考核。 根据学生实习期间的具体表现和实习报告的质量情况按五级分制（优秀、良好、中等、及格、不及格）对学生进行成绩评定。出勤情况占20%，平时表现占20%，实习报告占60%。  根据实习单位对学生的考核评语，实习报告写的内容和平时实习中的表现（学习和工作态度、遵守纪律方面情况）、答辩情况按五级分制（优秀、良好、中等、及格、 不及格）评定学生实习的成绩。		3个月
毕业论文（设计）	毕业论文是培养和检验学生结合所学基本理论、基本知识、基本技能分析问题、解决问题的能力，通过试验设计方案的构思和实施，使学生在意志品德、工作能力、工作态度和创新能力等方面得到全面提高。	选题要求内容与本专业培养目标一致，体现以生物技术手段解决生物制药、食品等相关行业的科学问题。注重专业性原则、创新性原则、学术性原则、可行性原则。	学生在教师指导下完成选题、开题报告、实验实施与过程记录、毕业论文撰写、答辩等各环节要求。 毕业论文成绩：指导教师评定成绩40%+评阅教师成绩20%+答辩成绩40%，根据总成绩实行五级评分制。 90-100：优秀；80-89：良；70-79：中；60-69：及格；60以下：不合格。	32周
天然药物化学实验	天然药物化学实验课的开设，可以使学生进一步理论联系实际，检验在课堂上所学的理论知识，加深对天然药物化学的基本理论和基本知识的认识和理解。重点是要加强对学生基本操作技能如提取分离方面、鉴定方面的训练。	要求掌握常用的经典方法的原理及操作。其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、 回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、反流分布法）、重结晶 法，掌握纸色谱、柱色谱（包括吸附柱、离子交换柱等）的原理和基本操作。	考核类型：考查 考核形式：提交成的实验报告 成绩组成：本课程属于独立实验课，平时成绩40%（包括上课纪律、实验预习和动手操作、实验结束后的整理等）+实验记录、总结（30%）+实验报告30%。	16学时
免疫学实验
微生物资源开发与利用实验
生物活性物质的提取与利用实验	本课程旨在通过理论和实践训练，让学生掌握分离纯化的基本原理，并能在实践中加以应用，锻炼学生处理分析检测工作的能力，同时适当向学生介绍前沿新技术和发展趋势，让学生掌握常见生物产物的提取、分离技术，掌握实用的现代分离纯化技术，为在生产实践中胜任生物资源产品的生产加工、质量管理等工作打下基础。	包括五个实验项目：其中必修实验有：（1）微生物细胞的破碎及破碎率测定；（2）双水相萃取分离糖化酶；（3）蛋白质的盐析与透析；（4）凝胶层析法测定蛋白质的分子量。选修实验项目有：香菇多糖的提取。详细实验内容见附件1。	考核类型：考查 考核形式：闭卷 成绩组成：本课程属于课带实验型，突出理论与实践运用的综合性，采取实验成绩（30%）+理论成绩（70%）的考核方式，实验成绩以百分制计包括：考勤（20%）、实验操作与课堂参与（30%）、实验报告（50%）。	16学时
生物制药工艺学实验
生物药物制剂实验
微生物发酵制药技术实验	《微生物发酵制药技术》是生物技术专业（生物制药方向）教学过程中重要的教学实践环节，它是在学习了有关基础课和专业基础课（如生物化学、微生物学、药理学、发酵工程与设备等）的基础上开设的，通过本课程教学使学生加深理解微生物制药学的基本理论，各种微生物生产的药物类型、特点、质量要求、工艺路线、提取方法和质量评价等方面的专业知识。结合微生物制药生产的理论、技术和质量控制等的基本理论知识，培养学生的实践技能，微生物制药工艺的优化与设计能力，学会研究和设计生产相应药物，培养学生的学习能力、科学分析综合能力及科学思维方法，为从事微生物制药的生产、研究、开发新的药物等工作奠定基础。	包括4个实验项目：（1）链霉菌的活化；（2）链霉菌摇瓶种子的制备；（3）链霉菌摇瓶种子的发酵生产；（4）链霉菌发酵产物的活性测定。详细实验内容见附件4。	考核类型：考查 考核形式：闭卷 成绩组成：本课程属于课带实验型，突出理论与实践运用的综合性，采取平时成绩（30%）+考试成绩（70%）的考核方式，实验成绩以百分制计包括：考勤（20%）、实验操作与课堂参与（30%）、实验报告（50%）。	16学时
中药炮制技术实验	了解中药炮制各种方法的操作方法、炮制目的，加强学生的感性认识中药炮制技术实践性强，培养学生能够从事中药饮片生产与加工、中药制剂、中药调剂、中药养护以及中药质量控制等工作，能胜任中药炮制 员、中药药剂员、中药调剂员、中药养护员、质量监控员等相关工作岗位。	掌握药材的软化方法、程度及条件，掌握手工切制及机器切制和饮片干燥的方法，握炒黄、炒焦和炒炭的基本操作方法和成品的质量标准 掌握加固体辅料炒的操作方法及成品的质量标准等	考核类型：考查 考核形式：提交成的实验报告和中药成品。 成绩组成：本课程属于独立实验课，平时成绩40%（包括上课纪律、实验预习和动手操作、实验结束后的整理等）+实验记录、总结、实验报告（30%）+中药成品30%。	16学时
辅料与包装材料实验
药品及原材料保管与养护实验	要求学生通过学习能掌握药品仓储业务流程及相关法规，能规范办理药品进、出库等仓储业务，熟悉岗位工作职能要求与操作程序和注意事项，具备从事各类药品储存保管与养护的工作技能。该课程是一门综合性应用技术学科，它来源于实践，又能动地指导实践。鉴于课程的特点，在教学过程中，为了能有效地提高学生的专业技能和职业能力，综合运用现代化信息技术，结合工作过程导向的理实一体化教学模式，研究采用传统仪器培训、参观学习结合虚拟仿真实训教学法在《药品储存与养护》课程教学中的应用与实践，进一步提高教学质量。	要求掌握库房及环境条件监测与GSP条件下的控制技术。对比传统与现代技术条件下的操作与质量控制。对药品库房的温度、湿度、压力、氧气含量、二氧化碳含量、烟气等的远程监测；GSP条件下，与非GSP条件下管理情况。仓储环境监控无人值守的条件与要求	考核类型：考查 考核形式：提交成的实验报告 成绩组成：本课程属于独立实验课，平时成绩40%（包括上课纪律、实验预习和动手操作、实验结束后的整理等）+实验记录、总结（30%）+实验报告30%。	16学时
药品生产质量管理	通过本课程实验，加深学生对药品生产质量管理理论知识的理解和巩固；使学生熟悉企业药品生产质量管理体系，基本掌握药品生产质量管理实践中有关的基本要求和操作技能；通过综合性实验和设计性实验，培养和提高学生的实验设计能力，实验动手能力以及文献资料收集整理的能力；培养学生的科学思维方法，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力。	实验一：模拟人员进出洁净生产区的程序 实验二：绘制典型制药车间平面图 实验三：填写药品批生产记录训练 实验四：制药企业参观	考核类型：考查 考核形式： 实验预习及实验操作过程60%+实验报告40%。	16学时
药事管理法规与GMP
生物制药设备与保养	《生物制药及设备养护》是生物技术产业化的重要组成部分，是实现生物技术工程化的载体， 具有实践性强、应用面广、内容更新快的特点。通过这门课程的学习, 学生能够较好地掌握制药工厂的设备流程、 设备结构及工作原理、设备的操作、设备的优缺点和适用场合、主要设备的设计计算与选型、初步了解一般设备的安装维护。对学生综合能力的培养，提高学生整体的素质，为在今后的学习和工作中提高实践能力和创新能力都起着重要的作用。	以综合实验为例实际开展典型灭菌及菌种培养设备：灭菌锅类型、 结构、性能、应用、操作维护及常见问题处理；并虚拟仿真辅助进行仿真练习学习，掌握药品压片技术仿真实训系统，青霉素发酵工艺仿真软件训练。	考核类型：考查 考核形式：提交成的实验报告 成绩组成：本课程属于独立实验课，平时成绩40%（包括上课纪律、实验预习和动手操作、实验结束后的整理等）+实验记录、总结（30%）+实验报告30%。	16学时

 

  

    综合实践训练包含专业综合技能与更高层次的一般技能（如交际技能、交流技能、信息处理技能、团队协作技能技能、组织管理技能、创业技能等），通过个性创新型实验实训实现（表5）。 

表5 生物技术综合实践训练体系

课程或项目名称	教学目标	主要内容	考核要求	实践时数
生产工艺流程管理训练
生产质量管理训练
毕业实习
创新能力训练
创业能力训练
学科竞赛
毕业论文

2、实施体系 

    实施体系是实践教学的执行系统，包括实践教学实施主体、实施形式和实践教学方法两部分。  

（1）实施主体 

    实践教学的组织实施在教务处的统一领导下，由学院组织，教研室负责实施，根据实践教学的具体形式，由专业教师、外聘教授和工程师等作为指导教师或带队教师带领学生完成实践教学，同时明确对带队教师和指导教师的要求。 

（2）实施形式 

    主要有实验、实训（含设计、技能训练）、实习、社会实践、第二课堂等教学实施形式。

实验是为具体课程教学设计，作为课堂理论教学的辅助，通过实验，使学生对课程理论和知识点加深理解，同时训练学生的基本操作技能。实验项目应避免开设过多的验证性实验，鼓励多开设综合性实验、设计性实验和研究性实验等。    

实训是按照人才培养的规格要求，对学生进行的专业技术应用能力训练的教学活动。通过各种实训，使学生能够掌握从事专业领域实际工作的操作技能和专业技术应用能力，尤其是综合实训，通过模拟项目、模拟案例对学生进行解决实际问题的综合能力训练。

    实习是在教师的组织和指导下，学生到实际生产环境中，深入具体岗位，综合运用专业知识、专业技能于实践中，同时感受实际的生产氛围，训练生产、技术、设备等方面的组织管理技能，感受企业文化，培养吃苦耐劳、负责任、团结协作、创新的精神的教学活动。 

    社会实践是课堂教育的有益补充和延伸，是实现理论课堂与实践课堂有机结合的有效途径。以了解社会、服务社会为主要内容，以形式多样的社会实践活动为载体，引导大学生走出校门、深入实际，开展教学实践、专业实习、社会调查、生产劳动、志愿服务、公益活动、科技发明和勤工助学等，以获得直接经验，发展实践能力、增强社会责任感和理想信念。 

    第二课堂主要包括学生社团、各类培训、考证考级、自主实践、学科竞赛与科技活动等。 

（3）教学方法 

   实践教学方法根据实践教学特点及实训内容灵活选择，要采用先进的教学方法，如项目教学法、现场教学、情境教学法、案例教学法等。 

3、管理体系 

    实践教学管理体系包括实践教学组织管理、运行管理和制度管理3个方面。 应抓好4个环节：准备工作环节、初期安排落实环节、中期检查环节和成绩评定及工作总结环节。做到6个落实：计划落实、大纲落实、指导教师落实、经费落实、实践基地落实和考核落实。要建立起科学高效的内部反馈机制，及时发现管理上的漏洞；同时根据实践教学运行的情况，及时纠正实践教学运行、内容上的偏差。 

（1）组织管理 

    由学院对实践教学进行宏观管理，制定相应的管理办法和措施。各专业教研室具体负责实践教学的组织与实施工作。 

（2）运行管理 

    各专业要制定独立、完整的实践教学计划，并针对实践教学计划编制实践教学大纲，编写实践教学指导书，规范实践教学的考核办法，保证实践教学的质量。 

（3）制度管理 

    制定一系列关于与实践教学实施形式相配套的实践教学管理文件，以保障实践教学环节的顺利开展。 

4、保障体系 

   保障体系包括师资队伍、校内外实验实训基地和实践教学文件等。 

   以“双师型”队伍建设为契机，通过“送出去、请进来”等途径，培养和提高现有教师队伍素质，同时引进相关行业企业的专家，建立一支具有现代教育理念和创新精神、教学能力强、熟悉生产领域、掌握过硬技术、乐于教书育人的高素质“双师型”师资队伍。 

    校内外实验实训基地建设应统筹规划、优化配置。一方面加强校内实验平台打造，满足基本的实践教学需要，并进一步提升服务能力；另一方面要加快推进校外实训基地建设，通过校企合作，实现资源共享、优势互补。 

    实践教学文件包括实践教学计划、实践教学大纲、实践教材（指导书）和实践教学管理文件等。应努力开发电子教材、视频实践教材、模拟实践软件等，建立实践教学管理平台。 

5、评价体系 

    要建立教师实践教学质量评价体系和学生实践教学学习评价体系两方面的评价体系，包括评价主体、评价标准和评价方式。 

    实践教学的评价学院统一管理，出台考核的总体要求和考核的指导性意见，各专业教研室从实际出发有针对性地对教师的实践教学质量和学生的实践技能掌握情况进行考核。 

    各实验实训项目均要建立科学完整的评价方式和评价标准，突出职业指向性，将实习实训单位的反馈意见作为评价标准的重要指标。

    采取科学、客观的评价方式。坚持过程考核与结果考核相结合，以过程考核为主，逐步推行教考分离，采取灵活多样的考核方式。 

五、实践教学体系建设的组织与实施 

   1、专业教研室从制订人才培养方案入手，进行实践教学体系建设与实施，由学院统一领导，各教研室具体负责。 

   2、学院制定与实践教学体系建设相关的配套文件并组织建设。 

   3、分年度总结实践教学经验，逐步推进实践教学改革，建设完善的实践教学体系。

 

 

 

                                              生命科学学院

                                                2017.6.18

 

 

 

 

 

 

 

 

附件

001《大学计算机》教学大纲

学分：3学分

理论学时：16 学时

实践学时：32 学时

一、课程性质与教学目标

该课程为计算机类课程的基础性、入门性课程，本课程教学的主要任务是使学生刚进入大学就能了解计算机文化，掌握操作和使用计算机的基本技能，能了解计算机技术的最新发展及应用，同时具有使用计算机获取知识、解决问题的方法和意识，是计算机教育中第一层次的课程。

二、基本要求

通过教学使学生正确理解和使用信息技术领域基本的名词术语，了解计算机的应用领域及其对现代社会各方面的巨大作用和影响。具备计算机科学的基本理论和基本常识。让学生了解微型计算机的基本常识。使学生能熟练使用Windows 7操作平台。掌握汉字编码的概念，熟练掌握一种Windows 7下的汉字输入方法。基本掌握Office 2010的主要软件Word2010 、Excel2010的使用方法。具有计算机网络的基本常识，熟练使用Internet，熟练掌握在Internet上获取、存储、传输、处理和应用信息的基本方法。

三、主要教学方法

讲授、讨论、练习、演示。

四、理论教学内容

第一单元计算机的基础知识

【授课学时】1学时

【基本要求】

了解计算机的发展及分类、特点及应用，了解系统的基本组成及其工作原理。掌握计算机系统中的基本概念和术语，了解计算机安全知识，了解计算机病毒的特点及防范的相关知识。

【教学重难点】

计算机系统的组成，计算机的分类及硬件。【授课内容】

1. 计算机的发展及分类；

2. 计算机的特点及应用；

3. 数据在计算机中的表示；

4. 数据与编码；

5. 计算机系统的组成；

6. 软件系统和计算机语言；

7. 计算机的分类及硬件。

第二单元 Windows7 操作系统

【授课学时】2学时

【基本要求】

了解Windows操作系统的特点，掌握Windows 7系统设置的基本操作，掌握Windows 7下窗口、文件夹及文件操作，掌握Windows 7平台上的应用程序的操作。

【教学重难点】

Windows 7的文件及文件夹管理，Windows 7的系统与环境的设置。

【授课内容】

1. 操作系统的概念、功能和分类；

2. Windows 7操作系统概述；

3. Windows 7的基本知识和基本操作；

4. Windows 7的程序管理；

5. Windows 7的文件及文件夹管理；

6. Windows 7的磁盘管理；

7. Windows 7的系统与环境的设置。

第三单元文字处理软件Word2010

【授课学时】4学时

【基本要求】

掌握Word2010的启动与退出，熟练掌握Word2010建立文件、编辑文件的基本操作，熟练掌握Word2010格式排版的基本操作，熟练掌握Word2010表格的基本操作，熟练掌握Word2010图文混排的基本操作，掌握文档的页面设置与打印输出。

【教学重难点】

文档的排版与格式化，Word的图形功能。

【授课内容】

1. Word2010系统概述；

2. 文档的建立、编辑与保存；

3. 文档的排版与格式化；

4. 表格的制做与计算；

5. Word2010的图形功能；

6. 样式及模板的使用；

7. 页面的设置和打印功能。

第四单元电子表格Excel 2010

【授课学时】5学时

【基本要求】

了解电子表格的概念与基本功能，掌握工作表、工作簿的基本操作，掌握公式的使用，掌握表格数据的统计、绘制统计图，了解数据清单的操作。

【教学重难点】

公式与函数的使用，数据管理及数据的图表化。

【授课内容】

1. 电子表格的概念与基本功能；

2. 工作簿、工作表的建立与编辑；

3. 工作表的格式化；

4. 公式与函数；

5. 数据管理；

6. 数据的图表化；

7. 页面设置与打印；

8. 工作表的综合应用。

第五单元电子演示文稿制作软件

【授课学时】2学时

【基本要求】

掌握演示文稿的创建、打开和保存方法，掌握演示文稿视图的使用，幻灯片的制作、文字编排、图片和图表插入及模板的选用，幻灯片的插入和删除，幻灯片格式的设置，幻灯片特效和超级链接的使用，幻灯片放映的设置，演示顺序的改变，了解多媒体对象的插入，演示文稿的打印和打包的方法。

【教学重难点】

演示文稿的编辑，演示文稿中动画的设置，演示顺序的改变及幻灯片放映的设置。

【授课内容】

1. 中文PowerPoint 2010基本知识；

2. 演示文稿的基本操作；

3. 编排演示文稿；

4. 演示文稿中对象的操作；

5. 演示文稿中的动画和超链接技术；

6. 放映和打印演示文稿。

第六单元计算机网络的基本知识与操作

【授课学时】2学时

【基本要求】

了解网络的基本概念、分类及常用术语，了解网络的组成，了解局域网的使用，掌握Internet网的基本操作。掌握网络资源的查询和下载的基本方法。

【教学重难点】

Internet网的使用，网络资源的查询和网络资源信息的下载。

【授课内容】

1. 网络的基本概念、分类、组成及常用术语；

2. 局域网的结构及常用操作；

3. Internet网的基本知识；

4. Internet网的使用（WWW、Email、FTP、BBS的使用）；

5. 网络资源的查询；

6. 网络资源信息下载。

五、实验教学内容

项目一操作系统基本练习

【实验类型】验证

【实验学时】4学时

【实验目的】

掌握 Windows 7 的启动和退出；学会资源管理器、我的电脑的使用方法；掌握控制面板的使用、Windows 7 系统设置；掌握文件和文件夹的新建、选定、复制、重命名、删除和查找等操作。

【实验内容摘要】

查找C盘中所有jpg图片，然后按照大小排列，拷贝前2个到“Image”文件夹下；把资料包中audio文件夹下的css文件的扩展名修改为.txt类型，并设置为隐藏属性；把任务栏调整在左边并取消“显示时钟”，然后抓取当前桌面图像，利用画图程序保存，命名为“窗口图像.jpg”，放在Image文件夹下； 5.在桌面上分别为“记事本”和“画图”两个应用程序建立快捷方式，并把这两个快捷方式复制到Text文件夹下；查询磁盘的状态后然后回答下列问题：C盘：文件系统类型、已用空间、可用空间、容量，然后抓取“本地磁盘（C：）属性”窗口图像（注意：只抓取属性窗口，不是整个桌面），利用画图程序保存，命名为“本地磁盘图像.jpg”，放在Image文件夹下；选择合适的适配器模式，模式为：分辨率为800×600，增强色（16位），60赫兹，然后抓取“列出所有模式”窗口图像，利用画图程序保存，命名为“列出所有模式.jpg”，放在Image文件夹下。

【实验基本要求】

1.写出实验内容2-7的实验步骤；

2.写出实验中遇到的问题及解决的方法。

【主要仪器设备名称及规格、型号】

1.写出实验步骤；

2.写出实验中遇到的问题及解决的方法。

项目二 Word 的基本应用

【实验类型】验证

【实验学时】8学时

【实验目的】

掌握文档的建立、编辑与保存；掌握文档的格式设置；掌握对文档目录的设置与编辑、项目符号的编辑使用与编辑；图文混排的操作。

【实验内容摘要】

文档的基本操作练习：

1.打开任务一.docx文件；

2.将标题段(“1.国内企业申请的专利部分”)设置为四号蓝色楷体、加粗、居中，绿色边框、边框宽度为3磅、黄色底纹；

3.为第一段(“根据对我国企业申请的……覆盖的领域包括：”)和最后一段(“如果和电子商务知识产权……围绕了认证、安全、支付来研究的。”)间的8行设置项目符号“◆”；

4.为倒数第9行(“表4－2国内企业申请的专利分类统计”)插入脚注，脚注内容为“资料来源：中华人民共和国知识产权局”，脚注字体为小五号宋体。将该行文字效果设置为“文本边框的实线”；

5.将最后面的8行文字转换为一个8行3列的表格。设置表格居中，表格中所有文字中部居中；

6.分别将表格第1列的第4、5单元格和第3列的第4、5单元格进行合并，分别将第1列的第2、6单元格和第3列的第2、3单元格进行合并。设置表格外框线为3磅蓝色单实线，内框线为1磅黑色单实线。为电子相册中的图片加上超链接，按照提供的素材，单击第一幅图片时，在新窗口显示内容。

【实验基本要求】

1.写出实验步骤；

2.写出实验中遇到的问题及解决的方法。

【主要仪器设备名称及规格、型号】

1. 联网的计算机50台以上；

2. WindowsXP操作系统或更高版本操作系统。

项目三 Excel 的基本应用

【实验类型】验证

【实验学时】10学时

【实验目的】

熟悉Excel 2010的基本界面；掌握Excel 2010的文件的操作，掌握工作表的输入和编辑、数据格式的设置、公式和函数的使用；掌握工作表与工作簿的管理，图表的建立、编辑。

【实验内容摘要】

任务一：Excel基本操作

1.打开任务一.xlsx文件；

2. 将sheet1工作表的A1：D1单元格合并为一个单元格，内容水平居中；计算员工的“平均年龄”置D13单元格内（数值型，保留小数点后1位）；计算学历为本科、硕士、博士的人数置F5：F7单元格区域（利用COUNTIF函数）；

3.选取“学历”列（E4：E7）和“人数”列（F4：F7）数据区域的内容建立“簇状水平圆柱图”（系列产生在“列”），图表标题为“员工学历情况统计图”，图例位置靠上，设置数据系列格式图案内部背景颜色为紫色；将图插入到表的A15：F28单元格区域内，将工作表命名为“员工学历情况统计表”保存。

任务二：Excel高级操作

1.打开任务二.xlsx文件；

2.求出“销售额排名”；

3.对工作表“产品销售情况表”内数据清单的内容建立数据透视表，按行为“产品名称”，列为“季度”，数据为“销售额（万元）”求和布局，并至于现工作表的I5：M10单元格区域，工作表名不变，保存EXC.xlsx工作薄。

【实验基本要求】

1.写出实验步骤；

2.写出实验中遇到的问题及解决的方法。

【主要仪器设备名称及规格、型号】

1. 联网的计算机50台以上；

2. WindowsXP操作系统或更高版本操作系统。

项目四PowerPoint 的基本应用

【实验类型】验证

【实验学时】10学时

【实验目的】

掌握PowerPoint 2010的基本应用，如编辑文本、剪贴画和文件图片、艺术字等对象；掌握幻灯片的动画效果设置方法；掌握界面设计的一般方法和技巧，其中主要包括：界面的合理布局、界面颜色的恰当搭配、交互设计等。

【实验内容摘要】

1.利用PowerPoint 2010的“空白”模板，创建一个平行四边形课件演示文稿（效果图如图1所示）；

2.要求幻灯片的背景、字体、文字颜色可以不一样，但要美观；

3.对文字部分的每个对象进行“自定义动画”设置，动画方式自选；对所有幻灯片设置幻灯片切换效果，效果自选；

4.“导入”、“讲解”、“练习”、“小结”按钮使用超级链接链接到对应的幻灯片中，首页放入一个背景音乐，音乐自选；

5.将制作的演示文稿保存为自己的姓名后发送到教师指定的服务器。

【实验基本要求】

1.写出实验步骤；

2.写出实验中遇到的问题及解决的方法。

【主要仪器设备名称及规格、型号】

1. 联网的计算机50台以上；

2. WindowsXP操作系统或更高版本操作系统。

六、考核方式

考核类型：考试

考核形式：机试

七、主要参考资料

1. 《大学计算机》，刘益和，李尧，高教出版社，2015

2. 《大学计算机实验指导及习题测试》，李尧，刘益和，高教出版社，2015

编写人（签字）：张凯

审核人（签字）：唐年庆

二级学院负责人（签字）：刘益和

 

《动物学》实验教学大纲

一、实验课程基本信息

课程名称：动物学实验

英文名称：Animal  Biology  Experiment

课程编号：JC1640094

课程性质：课带实验

课程类别：专业实践

课程总学时：24

课程周学时：3

课程总学分：2

开设实验项目数：6-7

适用专业：生物技术

开课系部：生命科学学院

二、实验课程的目的与要求

实验目的：

通过动物生物学实验课的学习，使学生加深理解和巩固课堂讲授的知识，熟悉动物学的基本实验技能，提高动手能力及观察分析问题的能力，培养科学严谨实事求是的学风，为后续专业基础课程和专业课程的学习奠定良好的基础。

实验要求：

1．必须在实验前掌握课堂所学的理论知识，作好实验指导的预习，明确实验的目的要求；

2．充分发挥个人的主观能动性，态度严肃认真，亲手操作，掌握各种仪器的使用；

3．独立思考，分析研究，在规定的时间内按要求、细致准确地作好作业。作业不合格者，必须重作。

三、实验项目名称和学时分配

序号	实验项目名称	学时	实验 属性	实验类型	实验者类别	每组人数	必开/ 选开
1	显微镜的结构和使用及人口腔黏膜上皮细胞的涂片制备与观察	3	基础类	验证性	本科生	20	必开
2	草履虫采集、培养及观察	3	基础类	验证性	本科生	20	必开
3	水螅及涡虫采集及结构观察	3	基础类	综合性	本科生	20	必开
4	河蚌、螯虾的解剖及结构观察	3	基础类	综合性	本科生	20	必开
5	鲫鱼的外形观察、抽血技术和内部解剖	3	基础类	验证性	本科生	20	必开
6	青蛙的解剖和结构观察	3	基础类	验证性	本科生	20	必开
7	鸡人工采精技术及精液品质检查	6	基础类	综合性	本科生	20	必开

四、实验内容、要求和所用设备

实验编号：001

实验名称：显微镜的结构和使用及人口腔黏膜上皮细胞的涂片制备与观察

实验内容：显微镜的结构和使用方法及注意事项；人口腔膜上皮细胞的涂片制备方法及其结构观察，观察的同时巩固练习显微镜的使用方法。

实验要求：

1. 了解显微镜的基本构造，能够规范和较熟练地使用；

2. 掌握制作人口腔黏膜上皮细胞临时装片的方法；

3.了解动物细胞的基本结构及线粒体的活性染色显示。

仪器与材料：生物显微镜、镊子、无菌牙签、载片、盖玻片、滴管、吸水纸，0.9%生理盐水、0.1mol/L碘液(或0.1%亚甲基蓝或0.1%中性红染液)、0.02%詹纳斯绿B

操作与观察：

（一）显微镜的结构与实用

 1.显微镜的结构

 机械系统：镜座与镜柱、镜臂与镜筒、镜台与标本移动器、镜头转换器、焦距调节器

 光学系统：物镜、目镜

 光源系统：光源、聚光器、虹彩光圈

2.显微镜的使用

安放显微镜、检查、调光、调焦、低倍镜观察、高倍镜观察、油镜观察、复原显微镜

(二)人口腔粘膜上皮细胞的制备与观察

 1.滴1滴0.9%生理盐水于载玻片中央，簌口后，用无菌牙签粗的一端轻轻地在口腔颊部刮几下，将刮下的白色粘性物质放入载玻片的滴液内，轻轻涂抹使分散均匀(不可反复涂沫)；用镊子夹住一块洁净的盖玻片的一边，使另一边与载玻片上的滴液边缘接触，然后缓慢放下，以防产生气泡。用吸水纸从盖玻片边缘吸去多余的液体。

2.置低倍镜下寻找轮廓较清楚的单个细胞并移至视野中央，再转高倍镜观察。可见口腔粘膜上皮细胞呈扁平多边形或扁圆形，仔细辨认细胞核、细胞质和细胞膜等基本结构。观察时光线应暗些。

3.如细胞结构观察不够清楚，可在盖玻片一侧滴1滴0.1mol/L碘液(也可采用0.1%亚甲基蓝或0.1%中性红染液)，在盖玻片另一侧用吸水纸吸引，使碘液通过细胞进行染色，再置显微镜下观察，细胞质杂成浅黄色，而细胞核染成深黄色。

(三)口腔粘膜细胞活体染色显示线粒体

如上面的方法，将从口腔粘膜刮下的白色粘性物薄而均匀地涂在载玻片上，加1滴0.02%詹纳斯绿B染液，染色20min，盖上盖玻片，置显微镜下观察。高倍镜下可见细胞质无色，在细胞质中散在一些蓝绿色短杆状和圆形颗粒，即为线粒体。

实验注意事项

1.用无菌牙签在口腔颊部轻轻刮取口腔黏膜细胞，勿将深部细胞刮下。

2.涂布口腔黏膜细胞后即刻染色，以保证活细胞染色。

作业与思考：

绘人口腔粘膜上皮细胞结构图，并注明各部分名称。

 

实验编号：002

实验名称：草履虫采集、培养及观察

实验内容：草履虫采集方法、培养及结构观察

实验要求：

1.通过广泛查阅资料，掌握多种草履虫采集和分离纯化方法；

2.掌握多种草履虫培养方法；

3.掌握以草履虫为代表的原生动物的特点。

仪器与材料：烧杯、漏勺、光学显微镜、稻草、蛋黄、麦粒酵母等。

操作与观察：

(一)实验材料的采集和培养

 1.采集

大草履虫属于纤毛纲，全毛目，生活在有机质丰富且不大流动的河沟或池塘中，在春、夏、秋三个季节里生长繁盛，草履虫常在水面浮游，其聚集的地方看上去水面呈灰白色。舀取这样的水体表层，若发现有稀疏的针尖大小的白点在游动，则可断定多半已采集到了草履虫。

草履虫的包囊常附于新鲜的稻草、狗尾草的茎秆上。取其近根部的l~2节，剪成3cm长，加水4~5倍，放在温暖、光亮处，保持温度20℃~25℃培养5~7d即可得到草履虫。

2.培养

(1)狗尾草(或稻草)液培养草履虫

(2)麦粒液培养草履虫

(3)玉米培养液法

(4)酵母片培养液法

(5)沼液培养液法

(二) 草履虫的形态结构

1.外形

2.内部结构

(三)草履虫的生活习性

1.运动

2.食物泡的变化

3.草履虫的应激性：刺丝泡的发射；对盐度变化的反应；对酸刺激的反应

4.草履虫的生殖：无性生殖(分裂生殖)；有性生殖(接合生殖)。

作业与思考：

1.绘制草履虫放大详图，表示出各种结构，并注出其名称。

2.通过对草履虫的观察，了解原生动物的主要特征。

3.通过对草履虫的观察，总结单细胞动物有哪些细胞器的分化，各

有什么功能?

 

实验编号：003

实验名称：水螅及涡虫采集及结构观察

实验内容：水螅、涡虫采集方法和结构特点

实验要求：

1.通过对两种代表动物水螅和涡虫形态结构的比较观察，了解腔肠动物门和扁形动物门主要特征的异同；

2.学习水螅和涡虫的采集和培养。

仪器与材料：光学显微镜、体视镜、镊子、解剖针、放大镜、玻璃器皿、培养皿、吸管、活体水螅涡虫标本、水螅涡虫整体及切面玻片标本。

操作与观察：

(一)水螅纵、横切片标本的观察

1.横切片

在低倍镜下观察水螅的横切片，要求认出组成体壁的外胚层、中胶层和内胚层以及消化循环腔。

2.纵切片

在低倍镜下观察水螅的纵切片，区别出水螅的口端和基盘，触手和消化循环腔。结合横切片的观察，辨认出组成体壁的外胚层、中胶层和内胚层。然后仔细观察纵切的触手，注意其结构与体壁是否相同，触手是否有腔，它与消化循环腔的关系怎样。若有芽体，注意观察芽体的着生部位及与母体的关系。将体壁较清晰的部分移至视野中央，转高倍镜观察。

(二)涡虫装片观察

消化系统、排泄系统、神经系统、生殖系统、横切面玻片标本的观察（外胚层、中胚层、内胚层）

（三）水螅和涡虫的外形及特性观察

1.观察水螅和涡虫的外形；

2.观察水螅的取食、刺细胞及对刺激的反应和涡虫运动及其对刺激的反应。

作业与思考：

1.通过对两种代表动物水螅和涡虫形态结构的比较观察，总结腔肠动物门和腔肠动物门主要特征的异同；

2.总结水螅和涡虫在培养过程中应注意哪些方面？

 

实验编号：004

实验名称：河蚌、螯虾的解剖及结构观察

实验内容：

1.活体河蚌、螯虾外部形态观察

2.河蚌、螯虾内部解剖与观察

实验要求：

通过对河蚌、螯虾活体河蚌、螯虾外形及内部解剖观察，了解软体动物门和节肢动物门的一般结构及特征。

仪器与材料：解剖器具、河蚌螯虾浸制标本、活体河蚌螯虾

操作与观察：

（一）河蚌

1.外部形态及特征观察：外形、运动、呼吸与摄食、心搏

2.内部结构观察：外套膜和外套腔、肌肉、入水管与出水管、贝壳内面、足、呼吸系统、循环系统、排泄系统、生殖系统、消化系统、神经系统

（二）螯虾

1.外形：头胸部、腹部、附肢

2.内部结构：呼吸器官、肌肉、循环系统、生殖系统、消化系统、排泄系统、神经系统

作业与思考：

1. 绘制河蚌、螯虾内部解剖结构图。

2.总结以河蚌为代表的瓣鳃纲和以螯虾为代表的腹足纲的结构特点。

 

实验编号：005

实验名称：鲫鱼的外形观察、抽血技术和内部解剖

实验内容：鲫鱼外形观察、尾柄抽血技术及内部结构观察

实验要求：

1.掌握鱼类适应水生生活的形态特征；

2.掌握临床上常见且较为重要的尾柄采血法；

3.掌握硬骨鱼内部解剖的基本操作方法。

仪器与材料：解剖器具、注射器。

操作与观察：

（一）外形：鲫鱼体呈纺锤形，略侧扁。身体可区分为头、躯干和尾3部分。

外形观察完毕，剪去鲫鱼左侧体壁，掀去左鳃盖，先原位观察内脏器官的结构。

解剖注意事项:

1.解剖时，解剖剪的刀尖应该稍向上挑起，绝对不能插入体腔太深，以免损坏内脏。

2.注意揭开左侧体壁之前先将体腔膜与体壁分开，以使内脏器官与体壁分开时不致被损坏，

3.肛门内侧是输尿管、输精管（或输卵管）的汇集处。稍不慎就会损坏输尿管、输精管（或输卵管），影响实验效果。因此，在肛门处开剪时，可采取逐层解剖的方法剪开体壁，或者避开尿殖孔剪开体壁。

(二）内部结构观察

1.原位观察  

2.观察内脏自然位置

3.生殖系统：由生殖腺和生殖导管组成。精巢白色俗称鱼白。卵巢黄色。生殖导管是生殖腺表面的膜延伸形成的细管。

4.呼吸系统：咽喉两侧有鲜红色的鳃。每侧各有4个全鳃，全鳃呈镰刀形。　每个全鳃都有2个鳃片，内侧着生在一根细长弯曲的鳃弓上。鳃弓的内凹面有两行尖齿状的鳃耙。每个鳃片由许多跟鳃弓成放射状排列的鳃丝组成。鳃丝两侧又生有许多鳃小片鳃小片上分布着丰富的毛细血管。所以，活鲫鱼的鳃是鲜红色的。

5.消化系统：移去左侧生殖腺，观察肝胰脏、肠管、胆囊。剪开口角，用镊子展开肠，观察上下颌、舌、鳃裂、咽齿、食管、胃、肠、肛门。

6.排泄系统：包括肾脏、输尿管和膀胱。除去鳔，观察肾脏（一对，红褐色）、输尿管（一对，）和膀胱（一个）。

7.循环系统 ：去掉左侧体壁和鳃盖即可看到其心脏，按心脏跳动的顺序可区分：静脉窦、心房、心室，另外还有动脉球。

8.脑：从两眼眶下沿体长轴剪开头部背面骨骼，再在两端横剪两下，用镊子移去头部骨骼，用棉球吸去发亮的脑脊液，观察脑的结构。

9.鲫鱼骨骼标本示范

作业与思考：鱼类有哪些适于水生生活的形态结构特征？

 

实验编号：006

实验名称：青蛙的解剖和结构观察

实验内容：青蛙的解剖和内部结构观察

实验要求：

1.掌握两栖纲的解剖方法；

2.了解两栖动物消化、吸收、泄殖系统和神经系统的形态结构及特点；

仪器与材料：青蛙、解剖器具、骨骼标本

操作与观察：

(一)蛙的外部形态

1.将活蛙(或蟾蜍)静伏于蜡盘内，观察其身体，可分为头、躯干和四肢3部分。

头：外鼻孔、眼、眼睑、鼓膜、鸣囊（声囊）、口腔。

四肢：前肢、后肢。

躯干：短胖，光滑无鳞、富含黏液与微血管（可行呼吸）、皮肤与肌肉分离，具胸骨无肋骨，无横隔，体腔无胸腹之分。

泄殖腔：尿液、粪便和生殖细胞均送泄殖孔排出体外。

2.皮肤

   蛙背面皮肤粗糙，背中央常有1条窄而色浅的纵纹，两侧各有1条色浅的背侧褶。背面皮肤颜色变异较大，有黄绿、深绿、灰棕色等，并有不规则黑斑。腹面皮肤光滑，白色。

   用手抚摸活蛙(或蟾蜍)的皮肤，有黏滑感，其黏液由皮肤腺分泌。

3.雌性和雄性的区别：

雄性：有鸣囊，体型小，体色深，前肢最内指有粗厚肉垫。

排精:睾丸——输精细管——肾——输精输尿管——泄殖腔——泄殖孔

排尿：肾——输精输尿管——膀胱——泄殖腔——泄殖孔

雌性：无鸣囊，体型大，体色浅，前肢最内指无粗厚肉垫。

排卵:卵巢——输卵管——子宫——泄殖腔——泄殖孔

排尿：肾——输尿管——膀胱——泄殖腔——泄殖孔

（二）双毁髓法

1.毁蛙脑  左手握蛙，背部向上，中指抵住蛙胸部，拇指按住蛙背，用食指上抬蛙的头部，使头与脊柱相连处凹入。右手持解剖针，自两眼之间沿中线向后触划，当触到凹陷处即为枕骨后凹。将解剖针由凹陷处45°角刺入，将针尖从枕骨大孔向前穿入颅腔，并左右摆动切断脑组织。

2.毁髓  在毁脑后，将针退回枕骨大孔，然后向后与脊柱平行方向穿入椎管，捣毁脊髓。若蛙四肢松软下垂，表明毁脑、毁髓成功。

（三）蛙的内部结构观察

1.解剖

将蛙置于蜡盘上，腹部朝上，四肢伸展后用大头针固定。用镊子提起腹面皮肤，用剪刀剪开一小口，并从小口处向前将腹面皮肤剪开，至下颌前端。向后剪至两后肢基部之间、泄殖孔稍前方。然后将皮肤向两侧拉开，可见皮肤与皮下肌肉连接松散，两者之间较大间隙为皮下淋巴腔，翻看皮肤内侧可见分布有丰富的血管。再用镊子提起腹部肌肉，用剪刀沿腹中线略偏左侧（避开腹大静脉），剪开腹壁至肩带之剑突，然后向左、向右剪开。小心剥离腹壁上的腹大静脉，再将腹壁向两侧翻开，用大头针固定在蜡盘上，暴露内脏。可见心脏位于体腔前端，外由包心膜包裹。心脏背面两侧之囊状器官为肺（有时肺囊会充气如吹胀的气球）。肝脏、胃等位于心脏的后方。再用镊子提起腹部肌肉，用剪刀沿腹中线略偏左侧（避开腹大静脉），剪开腹壁至肩带之剑突，然后向左、向右剪开。小心剥离腹壁上的腹大静脉，再将腹壁向两侧翻开，用大头针固定在蜡盘上，暴露内脏。可见心脏位于体腔前端，外由包心膜包裹。心脏背面两侧之囊状器官为肺（有时肺囊会充气如吹胀的气球）。肝脏、胃等位于心脏的后方。

2.内部结构观察

消化系统：食道、胃、肠、肝脏、胰脏、脾脏

呼吸系统：鼻、气管、肺脏、

排殖系统：排泄系统、雌性和雄性生殖系统

循环系统：心脏：心室、左右心房、动脉圆锥（在心房的腹面）、静脉窦（在心脏的背面）

动脉：动脉干分成两支，每一支包括颈动脉、体动脉和肺皮动脉

静脉：一对前腔静脉、一个后腔静脉，注入静脉窦

作业与思考：

通过实验总结两栖类初步适应陆生生活但又不完善的形态结构特征。

 

实验编号：007

实验名称：鸡人工采精技术及精液品质检查

实验内容：

1.公鸡采精训练

2.人工采精技术方法

3.精液品质检查

实验要求：

1.以小组为单位，每人必须亲自操作。

2.系统地掌握整套人工授精技术。

仪器与材料：显微镜、载玻片、盖玻片、一次性塑料瓶

操作与观察：

（一）采精准备工作

1.公鸡的选择  

选择4-5月龄公鸡2只。选择标准：体格健壮、发育良好、腹部柔软、性反射良好（按摩时有肛门外翻）、交姌器勃起等性反射。

2.器具清洗消毒

所有器皿均清洗干净后，消毒烘干后备用。

3. Jaskowski染液和稀释液预热

置于36-37℃恒温水浴锅中。

4.公鸡采精训练

正式采精前2周剪掉种公鸡泄殖腔周围的羽毛，采用双人背式按摩法进行采精训练，隔日1次。

（二）采精

经过两周采精训练，进入正式采精阶段。

（三）精液品质检测

1.气味、色泽及精液量

检测方法用肉眼目测法。检测标准：正常新鲜的公鸡精液为乳白色、较粘稠、微腥的液体。精液密度越高，乳白色越浓，精液密度低的，则颜色变浅。混有血液的呈粉红色；混有粪便的呈黄褐色；混有尿酸盐的呈白色棉絮状；混有透明液的呈清水状；有病无精子的呈黄水状。总之，凡有颜色异常者不宜用于输精。

2. pH值

用移液枪吸取新鲜精液10uL于精密pH试纸上，5分钟后观察结果。

3.活力

在载玻片上滴上一小滴新鲜精液，盖上盖玻片。在400倍显微镜下随机选取4个精子分布较均匀的视野进行观察。活力又叫活率，指在精液中具有直线前进运动的估计百分率，用级数表示。检测标准：精子活力，视野中精子稠密，且所有精子运动方向100%呈直线运动的评为1.0级，90%呈以上状态评0.9，只有10%则为0.1。级数越高，品质越好。不健康的精子常在原地打转、振动或作回旋运动[7]。

4. 死活精子比率

涂片在精液采集后20min内完成。取10ulJaskowski染液置于载玻片上，然后加入10ul精液，轻轻混合30s，随后用另一边缘光滑的载玻片推成薄片。快速干燥后镜检（染液、载玻片在37。C的恒温箱中预热）。在1000倍显微镜下观察，随机挑选4个精子分布较均匀的视野计算死活精子比率（活精子数/总精子数X100%）。活精子不着色，死精子着红色[4]。

5.密度

在400倍显微镜下采用密度估测法和血细胞计数法。

6.畸形率

方法同血细胞计数法，在1000倍显微镜下观察，计算100个精子中畸形精子百分率。正常精液畸形率一般在5-20%之间。

作业与思考：

1.何为双人背式按摩法？

2.通过实验总结影响精液品质质量的因素有哪些？

实验主要设备和台件数

 

说明：“每组应配台件数”为一组学生做本项实验所需的仪器设备台件数。

五、实验报告

实验报告是实验过程的记录和体现，实验报告的内容应包括：实验名称、目的、内容、主要仪器设备、实验步骤、实验结果、绘图说明、作业等。实验报告的书写是一项重要的基本技能训练。它不仅是对每次实验的总结，更重要的是它可以初步地培养和训练学生的逻辑归纳能力、综合分析能力和文字和绘图表达能力。因此，要求参加实验的每位学生，均应及时认真地书写实验报告。要求内容实事求是，绘图清楚整洁，再配以相应的文字说明，分析全面具体，文字简练通顺。  

六、实验课程考核

1、该课程为考查课

2、具体考试办法：实验为独立设课，具体考核成绩由三部分构成：平时表现20%（实验的预习与操作、出勤情况）+ 实验报告30%+ 期末考核50%（实验理论考试、实验技能的考核）。

七、使用教材及主要教学参考书

使用教材：

李兴霞,齐泽民，段辉国.动物生物学实验指导，北京：中国农业科学技术出版社。

 

 

大纲编写人（签字）：李兴霞         

专业负责人（审核）： 张楠

二级学院教学负责人（审定）：谢碧文

 

 

 

 

《细胞工程》实验教学大纲

一、实验课程基本信息

课程名称：细胞工程实验

英文名称：Cell Engineering Experiment

课程编号：SJ1640059

课程性质：独立设课

课程类别：专业实践

课程总学时：30

课程周学时：3

课程总学分：2

开设实验项目数：6~10

适用专业：生物技术

开课系部：生命科学学院

二、实验课程的目的与要求

目的：

1.掌握细胞工程技术的基础知识、基本原理、实验操作方法和离体培养技术；

2.结合科研和生产实际，培养高等应用型技术人才，提高学生分析问题、解决问题的能力；

 3.提高学生实践动手能力、科学实验能力、技术推广与市场开拓能力和组

培苗工厂化生产经营与组织管理能力。

要求：

1．必须在实验前掌握课堂所学的理论知识，作好实验方案的预习，明确实验的目的要求；

2．要求学生学习态度严谨，操作动作规范，观察记录耐心细致；

3．独立思考，综合分析实验结果，充分理解后认真地完成实验报告。

三、实验项目名称和学时分配

序号	实验项目名称	学时	实验 属性	实验类型	实验者类别	每组人数	必开/ 选开
1	植物组织培养实验室参观与设计	3	基础类	验证性	本科生	20	必开
2	MS培养基母液的配制与保存	3	基础类	验证性	本科生	20	必开
3	培养基的配制与灭菌	3	基础类	验证性	本科生	20	必开
4	生姜试管苗继代增殖、生根及炼苗移栽	9	基础类	综合性	本科生	20	必开
5	矮牵牛离体培养	6	基础类	综合性	本科生	20	必开
6	花药愈伤组织诱导	6	基础类	设计性	本科生	20	必开

四、实验内容、要求和所用设备

实验编号：001

实验名称：植物组织培养实验室参观与设计

实验要求：

通过参观，使学生掌握如何组建植物组织培养实验室；同时，熟悉组培中涉及的各种仪器设备和器皿用具。

仪器与用具：

仪器：超净工作台，高压灭菌锅，冰箱，电炉，显微镜，空调机，电子天平、生化培养箱，烘箱等设备。

用具：镊子，剪刀，解剖刀，灭菌器，接种盘，封口膜等各种器械用具和培养瓶，培养皿等各种实验器皿

实验内容：

1）准备室（化学实验室）

面积：20m²左右

用途：器皿洗涤、培养基配置、分装、高压灭菌，植物材料的预处理，重蒸馏水的制备以及进行生理、生化因素的分析，试管苗出瓶，清洗及整理工作。

要求：明亮、通风

设备：工作台，橱柜，水池，仪器，药品等

2）缓冲室

面积：约3-5m²左右

用途：进入无菌室前需在缓冲室里换上经过灭菌的工作服、拖鞋，戴上口罩。

设备：2盏紫外灯，1个配电板，石英电力时控器等

3）无菌操作室（无菌室，接种室）

面积：10-20m²，视生产规模和超净工作台数量而定。

用途：材料的灭菌接种，无菌材料的继代，丛生菌的增殖或切割，嫩枝扦插生根等，是关键的部分，关系到培养物的污染率、接种工作效率等重要指标。

要求：干爽安静、清洁明亮、墙壁光滑平整不易积染灰尘，地面平坦无缝便于清洗和灭菌。门窗要密闭，一般用移动门窗。

设备：超净工作台、空调机，医用小平车，操作台、搁架、灭菌器等。

4）培养室

面积：视培养架多少及培养物数量而定。

用途：将接种到培养瓶等器皿中的植物材料进行培养的场所。

设备：

（1）培养架与灯光

培养架数目多少视生产规模而定，年产4万~10万苗需4~6个培养架；年产10万~20万苗约需8~10个培养架。每个培养架一般6层，总高度2m，每0.3m为一层,最下一层距离地面0.2m架宽以0.6m为好，架长以40W日光灯的长度来决定，即约1.26m。每层架子安装2盏日光灯。

（2）通风设备

在稍高处设置进风气窗，在其对侧近天花板处设置排风窗。

（3）边台、空调机、加湿器（除湿器）、各类显微镜、温湿度计。

5）驯化室

面积：视生产规模而定。

用途：组培苗（试管苗）移栽前进行炼苗。

要求：清洁无菌

设备：空调机、加湿器、恒温恒湿控制仪、喷雾器。

6）温室

面积：视生产规模而定。

用途：保证试管苗不分季节地常年生产。

设备：温度控制装置、通风口、喷雾装置、光照调节装置、杀菌杀虫工具及相应药物。

作业与思考：

    1. 将本次实训内容整理成实训报告。                                                                                      

2. 每人设计一个植物组织培养实验室的组建方案。

 

实验编号：002

实验名称：MS培养基母液的配制与保存

实验要求：掌握培养基母液配制的方法。

仪器与用具：

电子分析天平、托盘天平、烧杯（50mL, 100mL, 500mL, 1000mL）、量筒（1000mL,100mL, 25mL）、容量瓶（1000mL,500mL,100mL）、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉、冰箱。

实验内容：

    首先，按下表“MS培养基母液的配制”，将各种母液根据各自的扩大倍数，计算出扩大后的称取量，然后，分别进行药品称取和母液配制。

母液种类	成分	规定用量mg/L	扩大 倍数	称取量mg	母液定容体积mL	配1L MS培养基吸取量mL
大量元素	KNO3 NH4NO3 MgSO4·7H2O KH2PO4 CaCl2·2H2O	1900 1650 370 170 440	20	38 000 33 000 7 400 3 400 8 800	1000	50
微量元素	MnSO4·4H2O ZnSO4·7H2O H3BO3 KI Na2MoO4·2H2O CuSO4·5H2O CoCl2·6H2O	22.3 8.6 6.2 0.83 0.25 0.025 0.025	1000	22 300 8 600 6 200 830 250 25 25	1000	1
铁盐	Na2-EDTA FeSO4·7H2O	37.3 27.8	100	3 730 2 780	500	5
维生素和氨基酸	烟酸 甘氨酸 Vit.B1（盐酸硫胺素） Vit.B6 肌醇	0.5 2.0 0.1 0.5 100	100	50 200 10 50 10 000	500	5

（1）    MS大量元素母液的配制

    按照MS培养基配方的用量扩大20倍，将大量元素配制成20倍的母液。配制时先用量筒量取蒸馏水800mL，放入1000mL的烧杯中，依次分别称取KNO₃ 38g;

NH₄NO₃ 33g, MgSO₄·7H₂O 7.4g,  KH₂PO₄ 3.4g, CaCl₂·2H₂O 8.8g，按顺序先后倒入烧杯中，用玻璃棒搅动，待第一种化合物溶解后再加入第二种化合物，当最后一种化合物完全溶解后，将溶液倒入1000mL的容量瓶，用蒸馏水定容至1000mL,然后，倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。配制培养基时每升MS培养基吸取该母液量为50mL。

（2）    MS微量元素母液的配制

     将MS培养基配方中微量元素的无机盐用量分别扩大1000倍，用电子天平分别依次称取MnSO₄·4H₂O 22.3g， ZnSO₄·7H₂O 8.6g , H₃BO₃ 6.2g，KI 0.83g，Na₂MoO₄·2H₂O 0.25g，CuSO₄·5H₂O 0.025g，CoCl₂·6H₂O 0.025g，并用重蒸水逐个溶解，待全部溶解用容量瓶定容后，装入1000mL倒入细口磨砂试剂瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。配制培养基时每升MS培养基吸取该母液量为1mL。

（3）铁盐母液的配制

    在电子天平上准确称量2.78g硫酸亚铁(FeSO₄·7H₂O)和3.73g乙二胺四乙酸钠(Na₂-EDTA)，分别倒入盛有200mL蒸馏水的烧杯中，微加热并不断搅拌使之全部溶解。将两种溶液倒入同一个500mL的容量瓶中，混合均匀后，用蒸馏水定容至500mL，并倒入棕色磨口试剂瓶中，经室温放置一段时间令其充分反应后，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名、置于4℃冰箱保存备用。如果将新配制的铁盐母液立即放入冰箱中。则会容易形成沉淀。配制培养基时，每配制500mLMS培养基吸取此母液5mL。

（4）MS有机母液的配制

    用电子天平依次称取：肌醇（环己六醇）5000mg，盐酸硫胺素（维生素B1）5mg，烟酸25mg，甘氨酸100mg，盐酸吡哆醇（维生素B6）25mg，用蒸馏水依次溶解并定容后，装入500mL的磨口瓶中，贴上标签，注明配制日期、扩大倍数、配制人姓名，置于4℃冰箱保存备用。配制培养基时，每配制500ml MS培养基吸取该母液5mL。

（5）植物生长物质母液的配制

NAA母液：准确称量NAA 50mg，先用1-3mL 90%乙醇完全溶解后，加蒸馏水定容；也可以用少量碱（如1mol/L氢氧化钠）溶液，使之中和成为钠盐或钾盐，在水中溶解，再加水定容至100mL，即配成浓度为500mg/L的母液。贴上标签，注明名称、浓度和配制日期，放入4℃冰箱保存。

6-BA母液：准确称量50mg 6-BA，加入少量碱溶液（如1mol/L氢氧化钠）或稀酸（1mol/L盐酸）溶液使之完全溶解后，加蒸馏水定容至100mL，即配制成浓度为500mg/L的6-BA的母液。转入磨口试剂瓶中，并贴上标签，注明母液名称、浓度和配制日期，放入4℃冰箱保存备用。

作业与思考：

1. 为何要配制母液？配制母液有哪几种方法？

2. 母液配制过程中的注意事项有哪些？

 

实验编号：003

实验名称：培养基的配制与灭菌

实验要求：学习用母液法配制培养基以及掌握培养基灭菌的方法及操作过程。

器材与试剂：

    器材：电子天平、托盘天平、烧杯（50mL, 100mL, 500mL, 1000mL）、量筒（1000mL,100mL, 25mL）药勺、称量纸、玻璃棒、移液管（10mL, 5mL, 2mL, 1mL,0.5mL）、电炉（1000W）、石棉网、标签纸、记号笔、洗耳球、酸度计或pH试纸（5.0~9.0）、塑料瓶、冰箱、手提式消毒灭菌锅或卧式电压力灭菌锅。

    试剂：蔗糖、琼脂、活性炭、1N HCl、1N NaOH；6-BA、NAA等植物激素母液及MS基本培养基母液。

实验内容：

1）培养基的配方

生姜无菌苗增殖培养基：

MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖3%+琼脂条0.7%+活性炭0.5g/L(pH5.8)

2）培养基的配制

①  称取母液：将所需的各种母液按顺序放好，将洁净的各种玻璃器皿等放在指定位置。

本实验需配制的培养基所需吸取的各种母液的用量如表1所示：

母液名称	母液浓度	扩大倍数	500mL培养基吸取量
大量元素		20
微量元素		1000
有机成分		100
铁盐		100
NAA	0.1mg/mL
6-BA	0.1mg/mL

取50mL烧杯一个，用量筒量取大量元素母液，然后用各母液专用移液管分别吸取微量元素母液，有机母液、铁盐母液和生长物质母液，置于烧杯中备用。

②  培养基定容：取500mL烧杯一个，倒入400mL蒸馏水，将预先准备好的琼脂倒入烧杯中，将烧杯置于电炉上或微波炉内加热，待琼脂完全溶化后，加入蔗糖，充分溶解后，将准备好的大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素母液混合液倒入烧杯中，用蒸馏水将装过母液混合液的烧杯洗三遍，一并倒入1L的烧杯中，并加蒸馏水定容。

③  调节pH值：用1mol/LHCl或1mol/LNaOH将培养基pH值调节至5.8~6.0。用酸碱调节pH值时，应用玻璃棒不断搅拌后，再用pH试纸或pH计测试培养基的pH值。

④  分装：将培养基分装入相应的培养瓶中，每瓶大约40~50mL，盖上盖子，贴上标签。用记号笔注明培养基名称、配制时间及配制者姓名，待灭菌用。

3）培养基的灭菌：（灭菌条件：121℃，20分钟）

①检查灭菌锅外层锅内水位，水量过少时应加水。把分装好的培养基及其他需灭菌的各种器具和蒸馏水放入灭菌锅的消毒桶内。

②盖上锅盖，注意按照说明操作并确定已盖好，设置好温度和时间参数，开启电源加热灭菌。

③灭菌时间到后，先切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，待灭菌锅压力表指针降到0时，打开排气阀，旋松螺栓，开启锅盖，取出已灭菌的培养基。

④刚灭过菌的培养基成液体状，取出时不要用力摇动，否则会导致部分培养基沾附在瓶壁。放置在水平桌面上自然冷却。在室温下放置1-2天，观察有无微生物生长，以确定培养基是否彻底灭菌。经检查没有杂菌生长的方可使用。

作业与思考：

    1. 培养基配制过程中应注意哪些因素？

2. 哪些因素影响培养基的凝固？灭菌锅的使用应该注意哪些方面？

 

实验编号：004

实验名称：生姜试管苗的继代增殖、生根及驯化移栽

实验要求：

1.熟练规范化的无菌操作动作；强化掌握无菌操作技术流程。

2.通过实验，掌握运用植物生长调节物质调控植物器官分化的方法。

3.熟练掌握生姜试管苗增殖、生根与驯化移栽的基本知识和技能，且能灵活应用，为试管苗工厂化生产服务，并能够解决试管苗增殖、生根与移栽过程中遇到的问题。

实验材料、试剂及器具：

（一）生姜试管苗继代增殖培养

1、实验材料：组培室提供的生姜无菌试管苗；

2、试剂：MS母液，各种植物生长调节物质；

   培养基：MS+6-BA0.5.0mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖3%+琼脂条0.7% (pH5.8)

3、器具：接种盘、酒精灯、镊子、解剖刀、标签纸、记号笔

（二）生姜试管苗生根培养

1、实验材料：上次实验转接的生姜无菌增殖苗。

2、试剂：MS母液，各种植物生长调节物质。

   培养基：1/2MS+NAA0.1mg/L+2%蔗糖+0.7%琼脂条 (pH5.8)；

           1/2MS+IBA0.1mg/L+2%蔗糖+0.7%琼脂条 (pH5.8)；

3、器具：接种盘、酒精灯、镊子、解剖刀、标签纸、记号笔

（三）生姜试管苗驯化移栽

1、实验材料：上次实验转接的生姜无菌生根苗；

2、药品及用具：80%甲基托布津或50%多菌灵，镊子，基质（珍珠岩和泥炭土），温室大棚，尿素，磷酸二氢钾，喷壶，遮荫网。

实验内容：

1、接种室灭菌处理：接种前，用75%酒精棉球擦拭超净工作台台面，将培养基及接种用具放入超净工作台。房间用酒精喷雾降尘后打开超净工作台及接种室的紫外灯，照射约15~20min；然后关闭紫外灯，打开房间换气扇以及超净工作台的风机，通风15~20min后，即可进行无菌操作。

2、生姜试管苗继代增殖及生根培养：

1）准备进入接种间，用肥皂水清洗双手至手肘部位并在自来水下冲洗干净，进入缓冲室后套上鞋套，穿好经紫外灯照射过的工作服，戴好口罩。

2）在超净工作台前用75%酒精喷手，用镊子夹取生姜无菌组培苗于接种盘中，去掉叶片，解剖刀分割后切成单株，转接到增殖培养基中进行培养。30d后统计增殖率。

3）取增殖培养30d后的无菌苗，在超净工作台上用解剖刀分成单株，转接到生根培养基中进行培养。15d后观察生根情况。

4）用标签纸注明材料种类、接种时间、接种者姓名等；

5）清洁和整理工作台、工作环境。

接种中的注意事项：

 1）操作过程中尽量少说话、走动；

 2）整个接种过程要在酒精灯的火焰附近；

 3）接种时手尽量不要在接种盘上方移动；

 4）及时更换接种盘等器具，接种用具要反复灭菌，以免交叉感染。

3、生姜试管苗驯化移栽

1）驯化及清洗：取出生姜生根苗培养瓶，置室温散射光下1-2天，打开瓶盖，2-4天后用镊子轻轻取出组培苗，整齐放置于盆中在自来水中洗净培养基，特别要洗掉琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，再换自来水清洗一次。最后用1000倍多菌灵浸泡整株小苗10min（避免生长中污染），后期管理得当可有效控制污染的发生。

2）基质准备及移栽：

泥炭土：珍珠岩=3:1，均匀混合后用80%甲基托布津或50%多菌灵800～1000药液对基质喷洒消毒，装入50孔的穴盘中。用手指在基质上挖2～3㎝深的小洞，轻轻把生姜根部放入小洞，注意不要弄断根，然后用基质盖好。移栽过程中注意“浅不露根，深不埋心”的原则，移栽后浇定根水。

4、移栽后的管理

①温度管理

组培苗生长适宜温度为20～30℃。夏季温度高时，大棚内须通风散热，并常喷雾来降温保湿，每天喷雾3～5次，每次喷雾2～5min；冬季气温低时，大棚四周要密封好，以防冻伤组培苗。

②湿度管理

刚移栽的组培苗对水分很敏感，缺水则生长缓慢、干枯、成活率低。而喷雾过多则渍水烂根，温度高、湿度大时还易引发软腐病大规模发生。移栽后一周内（幼苗尚未发新根）空气湿度宜保持在90%左右，一周后，植株开始发新根，空气湿度可保持70%～80%。种植畦干湿交替有利于发根长芽。

③肥水管理

大棚移栽期间的施肥以叶面肥为主。叶面肥可以选择尿素、磷酸二氢钾、腐植酸类以及稀释10倍的MS培养基大量元素母液等。一般移栽后一周，植株新根发生后开始施1‰的尿素，7～10天喷一次，连续喷3次。长出新芽后每隔10～15天喷0.2%的尿素和磷酸二氢钾混合液。一般情况下，施肥后两天停止浇水。若空气对流太大，则视基质干湿度适当喷雾补水。

    观察统计：

（一）生姜试管苗继代增殖培养

1、统计污染率、增殖率。观察并记录试管苗生长情况。

2、以照片形式展示：刚转接的试管苗和30d后的增殖苗。图下作标示。

（二）生姜试管苗生根培养

1、统计污染率、生根率。观察并记录试管苗生长情况。

2、以照片形式展示：刚转接的试管苗和20d后的生根苗（注意角度，要照根）。

（三）生姜试管苗驯化移栽

1、统计成活率。观察并记录植株的生长情况。

2、以照片形式展示：刚移栽的植株和成活后的植株。

    作业与思考：

1、通过此次试验，写出你的收获和心得体会。

2、在接种过程中，通过哪些措施来防止杂菌对接种工具、接种材料的污染？

3、常见的细胞分裂素和生长素作用。

4、无菌操作的工作流程包括哪些具体内容？

5、分析总结试管苗驯化移栽成功的原因。

 

实验编号：005

实验名称：矮牵牛离体培养

实验要求：

    1.初步掌握外植体材料消毒的无菌操作技术。

    2.进一步熟悉无菌接种技术，克服不良操作习惯；

3.掌握矮牵牛不同外植体离体培养技术。

实验材料、试剂及器具：

（一）矮牵牛种子无菌播种

1、实验材料：组培室提供的矮牵牛种子；

2、试剂：MS母液；

   培养基：MS+3%蔗糖+0.7%琼脂条(pH5.8)

3、器具：无菌烧杯、酒精灯、镊子、标签纸、记号笔、无菌水

（二）矮牵牛不同外植体离体培养

1、实验材料：上次实验获得的无菌矮牵牛籽播苗；

2、试剂：MS母液，各种植物生长调节物质；

   培养基：

   MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3%+琼脂条0.7%（以根为外植体）

   MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖3%+琼脂条0.7%（以叶片为外植体）

3、器具：接种盘、酒精灯、镊子、解剖刀、剪刀、标签纸、记号笔

实验内容：

1、接种室灭菌处理：接种前，用75%酒精棉球擦拭超净工作台台面，将培养基及接种用具放入超净工作台。房间用酒精喷雾降尘后打开超净工作台及接种室的紫外灯，照射约15~20min；然后关闭紫外灯，打开房间换气扇以及超净工作台的风机，通风15~20min后，即可进行无菌操作。

2、矮牵牛离体再生体系的建立：

1）准备进入接种间，用肥皂水清洗双手至手肘部位并在自来水下冲洗干净，进入缓冲室后套上鞋套，穿好经紫外灯照射过的工作服，戴好口罩。

2）在超净工作台前用75%酒精喷手，取无菌烧杯，放入矮牵牛种子，用0.1%HgCl₂溶液浸泡4分钟，无菌水冲洗5~6次，接入MS培养基。

3）矮牵牛种子经7d预培养后得到无菌种子苗。此时取矮牵牛籽播苗幼根，剪取长度为0.5~1cm放入以根为外植体的培养基中。约5d左右，根颜色变绿，约3周，较多的浅绿色愈伤出现在培养的根切口上，将有愈伤的诱导物一起转接到新的芽诱导培养基（MS+BA 0.1 mg/L+NAA 0.01 mg/L），1~2周后，才看到芽点从愈伤上长出。约3周后，部分芽可长于0.5 cm。

4）取幼嫩叶片，用剪刀剪取长宽约0.5cm左右，接种于以叶片为外植体的培养基中。5 d左右,未污染的叶片伤口处有活跃分裂的细胞团，体积膨大。约3周，叶片有深绿色的芽点形成。约5周左右，大部分不定芽已经从叶片上直接再生。

5）用标签纸注明材料种类、接种时间、接种者姓名等。

6）清洁和整理工作台、工作环境。

    观察统计

（一）矮牵牛种子无菌播种

1、统计污染率、萌发率。观察并记录试管苗生长情况。

2、以照片形式展示：刚转接的试管苗和5~7d后的籽播苗。图下作标示。

（二）矮牵牛离体培养

1、统计污染率、分化率。观察并记录试管苗生长情况。

2、以照片形式展示不同阶段变化的矮牵牛试管苗情况。图下作标示。

作业与思考：

1. 初代培养的技术关键有哪些？

2. 菌类污染分为哪些类型？阐述其污染现象，产生原因及预防措施。

3. 总结矮牵牛不同外植体再生植株途径。

 

实验编号：006

实验名称：花药愈伤组织诱导

实验要求：

1、掌握花药单倍体培养的相关操作技术。

2、了解花药培养的意义。

仪器与用具：

超净工作台、立式灭菌锅、酒精灯、镊子、标签纸、记号笔、无菌水等。

实验内容：

1、学生分小组查阅植物花药培养相关文献资料，撰写实验方案，实验指导老师审阅并提出修改意见，学生完善实验方案后开始实验。

2、花药选择：根据实验期间气候条件，选择校园内及校园周边的开花植物，根据实验方案，选择适宜时期的花朵进行低温保存备用。

3、培养基制备：根据查阅的资料和实验方案，设计3-5种花药培养的配方，并自行进行培养基的制备。须接种前3-5天提前做好培养基备用。

4、愈伤组织诱导：将低温保存的花朵，进行消毒后在超净工作台上剥开花瓣，切取花药接入培养基，每隔15天观察1次花药变化情况，并拍照做好实验记录（记录接种花药数、花药膨大数、形成愈伤组织数、污染数）。

6、撰写实验总结材料。

作业与思考：

根据本实验结果及查阅的资料，你认为影响花药愈伤组织形成的主要因素有哪些？

五、实验报告

实验报告是实验过程的记录和体现，实验报告的内容应包括：实验名称、目的、实验材料、主要仪器试剂、实验步骤、实验结果、作业等。实验报告的书写是一项重要的基本技能训练。它不仅是对每次实验的总结，更重要的是它可以初步地培养和训练学生的逻辑归纳能力、综合分析能力和文字和绘图表达能力。因此，要求参加实验的每位学生或每个小组，均应及时认真地书写实验报告。要求内容实事求是，绘图清楚整洁，再配以相应的文字说明，分析全面具体，文字简练通顺。

六、  实验课程考核

1、该课程为考查课

2、具体考试办法：实验为独立设课，具体考核成绩由三部分构成：平时表现30%（实验的预习与操作、出勤情况）+ 实验报告30%+ 期末考核40%。

 七、  使用教材及主要教学参考书

使用教材：自编讲义

主要参考书：

龚一富. 2011. 植物组织培养实验指导. 科学出版社。

王蒂. 2007. 细胞工程实验教程. 中国农业出版社。

王蒂. 2008. 植物组织培养实验指导. 中国农业出版社。

 

大纲编写人（签字）：王辉

专业负责人（审核）：陈发军

二级学院教学负责人（审定）：黄作喜